John Yohan Cho Seul, Güney Kore'de doğdu ve çocukken Los Angeles, Kaliforniya'ya taşındı. Babası Hıristiyan bir papazdı. Cho, Glendale'deki Herbert Hoover Lisesi'nde eğitim gördükten sonra Berkeley'deki Kaliforniya Üniversitesi'ne giderek İngiliz edebiyatı okudu. Mezun olduktan sonra Los Angeles'a geri döndü ve bir süre Pacific Hills School'da 7. sınıf İngilizce öğretmeni olarak çalıştı. Oyunculuk kariyerine Başkanın Adamları (1997), Çatlak Yönetmen (1999) ve eleştirmenlerin favorisi Better Luck Tomorrow (2002) gibi projelerde aldığı küçük rollerle başladı. İlk çıkışını gençlik romantik komedisi Amerikan Pastası'nda (1999) rol alarak yaptı ve "MILF" deyiminin ortaya çıkmasına yardımcı oldu. Bunu diğer roller izledi ve tembel komedisi Harold ve Kumar'da (2004) bir başka başarıya imza attı. Cho ayrıca, Hikaru Sulu'nun aranan rolüyle son derece başarılı olan Uzay Yolu (2009) serisinin yeniden başlatılmasında rol aldı ve bağımsız drama Columbus (2017), gerilim filmi Kayıp Aranıyor (2018) ve korku filmi Garez'de (2019) rol alarak Hollywood'da istikrarlı bir şekilde çalışmaya devam etti. Oyunculuğun yanı sıra şarkıcılık da yapan ve Viva La Union grubunda sahne alan Cho, aktris Kerri Higuchi ile evli ve iki çocukları var.