Harley Quinn Smith, Red Bank, New Jersey'de Jennifer Schwalbach ve Kevin Smith'in çocuğu olarak dünyaya geldi. İki yaşındayken Smith ve ailesi Los Angeles'a taşındı. Profesyonel bir bas gitarist olma niyetindeydi, ancak daha sonra oyunculuğa aşık oldu.Lily-Rose Depp ile birlikte rol aldığı Yoga Hosers (2016) da dahil olmak üzere birçok filmde görüldü. Sessiz ve derinden (2001) filmiyle ilk oyunculuk deneyimini yaşayan Smith, Babasının kızı (2004) adlı dram filminde ve Tezgahtarlar 2 (2006) adlı komedi filminde cameo olarak yer aldı.