Lance Barber Battle Creek, Michigan'da doğdu. Orduda askeri polis memuru olan babası, Barber bir yaşındayken görev sırasında öldürüldü. Annesi onu Battle Creek'te tek başına büyüttü. Lance yedi yaşındayken Grease'in bir prodüksiyonunu izledi, oyunculuğa aşık oldu ve hayatının geri kalanında yapmak istediği şeyin bu olduğuna karar verdi. 1991 yılında Pennfield Lisesi'nden mezun oldu, ardından Kellogg Community College'a gitti ve burada ön lisans derecesini alırken okul yapımlarında sahne aldı. Jennifer Garner ile birlikte çalıştığı Barn Theatre'da bir yıl geçirdikten sonra Chicago'ya taşındı ve Del Close yönetimindeki ünlü Second City'de şansını denedi. Barber, Second City'de Jack McBrayer ile birlikte sahne aldığı beş yıl geçirdi. Denemek için Los Angeles'a taşınan Barber, ilk TV görünümünü Gilmore Girls'te yaptı. Çıkış rolü 2005 yılında HBO'nun The Comeback adlı dizisinde rol arkadaşı Lisa Kudrow ile birlikte Paulie G.'yi canlandırmasıyla geldi.2024 itibariyle Barber, The Big Bang Theory'nin bir spin-off'u olan Young Sheldon adlı TV şovunda George Cooper, Sr. Şef olan eşi Aliza ile birlikte Los Angeles'ta yaşamaktadır. Biri kız biri erkek iki çocuk babasıdır. Çalışmadığı zamanlarda çocuklarıyla ilgileniyor.