Annette O'Toole, annesi tarafından işletilen Houston dans stüdyosunda büyüdü. Televizyonda ilk kez iki yaşındayken The Don Mahoney Kiddie Trooper Show'da bir çocuk olarak yer aldı. On yıl boyunca aldığı şan ve dans derslerinin ardından 13 yaşına geldiğinde, annesiyle birlikte şov dünyasında kariyer yapıp yapamayacağını görmek için bir yıllığına Los Angeles'a gitti. İki ay içinde ilk profesyonel işini aldı: Danny Kaye Show'da Danny Kaye ile dans etmek. "Şarkı söyleme ve dans etme eğitimimi pek çok şekilde kullandım," diyor. "Bundan aldığınız disiplin bir oyuncu için harika."O'Toole'un ilk oyunculuk rolü My Three Sons'tı, ardından Gunsmoke, The Partridge Family, The Mod Squad ve Hawaii Five-O'da yer aldı. On yıllar boyunca aralarında Law & Order, Nash Bridges ve The Outer Limits'in de bulunduğu 40'tan fazla dizide, mini dizilerde (Lonesome Dove, Dead by Sunset, Jewels) ve TV filmlerinde rol alan Toole, özellikle Stand By Your Man'de Tammy Wynette'i ve Emmy adaylığı kazandığı The Kennedys of Massachusetts'te Rose Fitzgerald Kennedy'yi canlandırdı (ve şarkı söyledi) Stephen King'in It filminde Beverly Marsh'ı canlandırmak en güzel anılarından biri. (O'Toole favorilerini çekim deneyimine göre değerlendiriyor.) Bu yüzyılda, The Huntress'da bir ödül avcısını, Smallville'de Clark Kent'in üvey annesini (John Glover ile hayat boyu arkadaş oldukları) ve Kidding'de Jim Carrey'nin annesini canlandırdı. Şu anda beşinci sezon için yenilenen Netflix dizisi Virgin River'da düzenli olarak yer almaktadır. 1975 yılında Michael Ritchie'nin Smile filminde Genç Amerikan Güzeli yarışmacısını canlandırarak sinema kariyerine başladı. O zamandan beri 48 Saat, Cat People ve Superman III gibi ikonik filmlerde Lana Lang rolüyle yer aldı. (Superman'in üvey annesini ve burada kız arkadaşını canlandırdı.) Tüm TV ve filmler arasında en sevdiği film, Martin Short ile birlikte başrollerini paylaştığı 1987 yapımı Cross My Heart filmidir; filmde üçüncü randevularında olan ve her ikisi de en büyük sırlarını nasıl paylaşacaklarını bulmaya çalışan bir çifti canlandırmaktadır. Smallville'deki altı yıllık çalışması sona erdiğinde, son on yıldır yaptığı tiyatroya odaklanmaya karar verdi. New York'a gitti ve ilk seçmelerinde The Sea Gull'da rol aldı. Aralarında Adam Rapp'in Kindness, Tracy Letts'in Man from Nebraska ve Tennessee Williams'ın A Lovely Sunday For Creve Couer oyunlarının da bulunduğu birçok Broadway dışı yapımda rol aldı. (Broadway'de sahne almak hala hedefi.) Ayrıca Wendy Wasserstein'ın Third, Regina Taylor'ın Magnolia ve Jane Anderson'ın The Quality of Life gibi birçok bölgesel prodüksiyonda yer aldı. 2016 yılında Public Theatre'da Southern Comfort'ta rol aldı. Transseksüel erkek Robert Eads'i canlandırdığı bu rolle Lucille Lortel Ödülü'nü aldı. ("Bugün transseksüel bir erkeği işe alırlar," diyor. "Almaları gerektiği gibi.") O'Toole'un en tesadüfi oyuncu seçimi, Lifetime filmi Final Justice'de Michael McKean ile birlikte rol almasıydı. Birbirlerini tesadüfen tanıyan ikili, Portland'daki çekimler sırasında iyi arkadaş oldular. Los Angeles'a döndüklerinde ilk randevuları Bob Dylan, Joni Mitchell ve Van Morrison'ın yer aldığı 1997 UCLA konseriydi. Kısa süre sonra evlendiler ve her ikisi de önceki evliliklerinden iki çocuk sahibi oldular. Üretken şarkı yazarları - McKean'in rol aldığı Christopher Guest filmi A Mighty Wind için Akademi Ödülü adayı "A Kiss at the End of the Rainbow" şarkısını birlikte yazdılar - 2005 yılında repertuarlarını Los Angeles'ın her yerinde ve New York'taki Feinstein's at the Regency'de sahne alarak yola çıkardılar. Şu anda aynı adlı bir belgesele dayanan Harold ve Lillian adlı yeni bir müzikal üzerinde çalışıyorlar."Gerçekten şanslıyım çünkü sevdiğim bir şeyi erken buldum," diyor O'Toole, "ve şimdi o zaman olduğundan daha çok seviyorum."