Maya Rudolph 27 Temmuz 1972'de Gainesville, Florida'da bir müzik yapımcısı olan Richard Rudolph ve soul şarkıcısı Minnie Riperton'ın çocuğu olarak dünyaya geldi. Annesi Afro-Amerikalı, babası ise Aşkenaz Yahudisi'dir (Litvanya, Rusya, Almanya ve Macaristan'dan gelen bir aileden). 1973 yılında Maya, ailesi ve ağabeyi Marc Rudolph, Minnie'nin müzik kariyerini ilerletmek için Kaliforniya'ya taşındı. Minnie burada en ünlü single'ı olan ve şarkının sonunda "Maya, Maya, Maya" şarkısını söylediği "Lovin' You" şarkısını kaydetti; Riperton şarkının Maya için bir ninni olarak kullanıldığını söyledi. Ergenlik döneminde Maya, çocukluk arkadaşı Gwyneth Paltrow ile tanıştığı St. Paltrow'lar ve Rudolph'lar aile dostu oldular ve 2000 yılında Richard Rudolph ve Maya, Gwyneth'in rol aldığı Bruce Paltrow'un yönettiği Duets (2000) filminde müzik süpervizörü rolünü üstlendiler.1990 yılında Maya, Santa Cruz'daki California Üniversitesi'ne kaydoldu ve fotoğrafçılık alanında uzmanlaştı. Maya burada öğrenci arkadaşlarıyla birlikte "Supersauce" grubunu kurdu. 1994'te mezun olduktan sonra Maya gruptan ayrıldı ve kısa süre sonra Weezer'ın basçısı Matt Sharp'ın önderliğindeki The Rentals'a katıldı. Maya 1999 çıkışlı "Seven More Minutes" albümünde yer aldı ve "Barcelona" ve "My Head is in the Sun" şarkılarında geri vokal yaptı. Maya grupla turnelere çıkmaya başladı, geri vokal yaptı ve Moog synthesizer çaldı. The Rentals dağıldığında Maya, komedi alanında kariyer yapma hayalinin peşinden gitmeye karar verdi ve ünlü topluluk "The Groundlings"'e katıldı. 6 Mayıs 2000'de Maya, Saturday Night Live (1975) kadrosuna katıldı ve bu şovun en popüler sanatçılarından biri oldu. Ünlü skeçleri arasında moda divası Donatella Versace'nin birebir taklidi; kendi sabah talk show'u olan "Wake-up WakeField"'ın sunucusu lise öğrencisi "Megan" ve R&B parodisi "Gemini's Twin"'in üyelerinden biri yer almaktadır. 2006 yılında, efsanevi Robert Altman'ın yönettiği ve Garrison Keillor'ın NPR programından uyarlanan A Prairie Home Companion (2006) filminde başrol oynadı.Maya'nın partneri film yapımcısı Paul Thomas Anderson ile dört çocuğu var.