Lupita Amondi Nyong'o, 1 Mart 1983'te Mexico City, Meksika'da Kenyalı ebeveynler Dorothy Ogada Buyu ve Peter Anyang' Nyong'o'nun çocuğu olarak dünyaya geldi. Senatör olan babası o zamanlar siyaset bilimi alanında misafir öğretim görevlisiydi. Kenya'da büyüdü. 16 yaşındayken ailesi onu İspanyolca öğrenmesi için yedi aylığına Meksika'ya geri gönderdi. Massachusetts Hampshire College'da film çalışmaları okudu ve birkaç filmde yapım asistanı olarak çalıştıktan sonra Yale School of Drama'nın oyunculuk programından mezun oldu. 2013 yılında, ünlü yönetmen Steve McQueen'in 12 Yıllık Esaret (2013) filmindeki acımasız köle Patsey rolüyle ilk filminde sinema izleyicilerini etkiledi. Ayrıca MTV'nin ödüllü drama dizisi Shuga'da (2009) başrol oynadı, gerilim filmi Non-Stop'ta (2014) yer aldı ve büyük bütçeli Star Wars: Güç Uyanıyor (2015) ve Orman Çocuğu (2016) filmlerinde rol aldı.Lupita'nın sahnede oynadığı roller arasında "The Winter's Tale" (Yale Repertory Theatre)'da "Perdita", "Sonya" "Uncle Vanya", "The Taming of the Shrew"'da "Katherine" rollerinin yanı sıra Michael Mitnick'in "Elijah" oyununun orijinal yapımında yer aldı.Lupita, 2018 yapımı süper kahraman filmi Black Panther'de (2018) kadın başrol Nakia'yı canlandırdı.