Jolene Blalock San Diego, Kaliforniya'da doğdu ve büyüdü. 16 yaşındayken Avrupa ve Asya'da modellik kariyeri yapmak üzere evden ayrıldı. Blalock, 1998 yılında Amerika Birleşik Devletleri'ne geri döndüğünde henüz denenmemiş oyunculuk becerilerini sergilemek zorunda kaldı ve Stella Adler Akademisi ile Toronto'daki Second City Improv ve Second City Los Angeles'ta birkaç reklam filminde rol aldıktan ve yeteneklerini geliştirdikten sonra ilk oyunculuk deneyimini NBC'nin Veronica's Closet (1997) adlı dizisinde yaşadı. Kamera önünde zaten rahat olan Blalock'un cazibesi objektifin arkasından parladı ve kısa süre sonra Dennis Hopper ve Frank Langella ile birlikte TV için yapılan Jason and the Argonauts (2000) filminde Medea rolünü üstlendi. Blalock en çok Atılgan'daki (2001) Vulkan Alt Komutanı T'Pol rolüyle tanınıyor. 2004 yılında Blalock, Ray Liotta ile birlikte Slow Burn (2005) filmine imza attı. Daha sonra Starship Troopers 3: Marauder (2008) filminde Kaptan Lola Beck'i canlandırdı. Blalock, Doktor House (2004), Kanıt Peşinde (2000) ve CSI: Miami (2002) adlı televizyon dizilerinde konuk oyuncu olarak rol aldı. Live Nation'ın CEO'su ve Başkanı Michael Rapino ile evlidir.