James Joseph O'Neil Off-Broadway ve AEA'daki ilk çıkışını 47th St. Theatre'da Galt McDermott'un "The Hired Man" oyununda yaptı. Broadway'de James, Victor Garber ve Brooks Ashmanskas ile Roundabout'un "Present Laughter" canlandırmasında Fred'i canlandırdı ve Helen Hayes'te "Take Me Out"'un İkinci Sahne Canlandırmasında Jesse Tyler Ferguson'ı canlandırdı. Broadway dışında oynadığı oyunlar arasında Erica Schmidt'in Classic Stage Company'de Peter Dinklage ve Taylor Schilling ile birlikte rol aldığı "A Month in the Country" ve Jo Bonney'in Reg Rogers ve Enid Graham ile birlikte rol aldığı "Look Back in Anger" oyununda Cliff'i canlandırdı. Bölgesel kredileri arasında Hartford Stage Co, The Old Globe Theatre, Mark Taper Forum, South Coast Repertory Theatre, Williamstown Theatre Festival, Baltimore Center Stage, American Repertory Theatre, Huntington Theatre Company, Ojai Playwrights Conference, Repertory Theatre of St. Louis, American Stage Festival, Alabama Shakespeare Festival, Pioneer Theatre Company ve Long Wharf Theatre'da Christopher D. Betts, Erica Schmidt, Brian Kulick, Darko Tresnjak, Sarah Benson, Anne Kaufman, Barry Edelstein, Kwame Kwei-Armah, Irene Lewis, Martin Benson, Benny Sato Ambush, Nicholas Martin, Jack O'Brien, Craig Noel ve daha birçok yönetmenle çalıştı. James, Old Globe/USD (MFA) ve Adelphi Üniversitesi'nde (BFA) eğitim almıştır.