John Mark Galecki Belçika'nın Bree kentinde Amerikalı bir ailenin çocuğu olarak dünyaya geldi; babası ABD Hava Kuvvetleri'nde görevliyken orada bulunuyordu. Üç yaşındayken ailesi Chicago, Illinois'e taşındı ve burada anne ve babası Mary Lou ve Richard Galecki ile kardeşleri kız kardeşi Allison (1980) ve erkek kardeşi Nick (1982) ile birlikte büyüdü. Babası Polonya kökenli, annesinin soyu ise İrlandalı ve İtalyan'dır. Annesi bir ipotek danışmanıydı ve babası Chicago dışındaki bir VA hastanesinde kör gaziler için öğretmen oldu. Galecki on altı yaşındayken babası bir kazada öldü. Annesi People dergisine verdiği bir röportajda Galecki'nin çok sanatsal bir çocuk olduğunu hatırladı; sadece 4 yaşındayken ona şöyle demişti: "Anne, ben televizyona çıkacağım ve büyüdüğümde demek istemiyorum." İki yıl sonra, sporla dikkatini dağıtma girişimleri başarısız olunca, Galecki'nin ailesi onu Chicago'daki yerel tiyatrolarda açık seçmelere götürdü. İlk rolünü "Fiddler on the Roof," oyununda aldı ve bunu diğer yapımlarda daha fazla rol izledi. 11 yaşına geldiğinde, "The Member of the Wedding "de canlandırdığı John Henry karakteriyle Joseph Jefferson Citation adaylığı almasının da gösterdiği gibi, Chicago'nun tiyatro sahnesinde mükemmel bir oyuncu olarak tanınmaya başlamıştı."1989 yılında ilk filmi olan Noel Baba'nın Geyiği (1989) adlı tatil filminde rol aldı, ancak büyük çıkışını Çılgın Aile Yılbaşı Tatilinde (1989) adlı başka bir Noel filminde Chevy Chase'in oğlu Rusty Griswold rolüyle yaptı. Sette Chase ondan hoşlandı ve Galecki daha sonra verdiği bir röportajda Chevy Chase'in ona komedi zamanlaması için bazı püf noktaları gösterdiğini hatırladı.O zamana kadar tüm ailesi kariyerini desteklemek için Chicago'dan Los Angeles'a taşınmıştı. Ancak 10 ay içinde Chicago'yu çok özlediklerini fark ettiler ve evlerine geri döndüler. Henüz 14 yaşında olan Galecki, Robert Urich'le birlikte American Dreamer (1990)" adlı bir dizide oynuyordu, bu yüzden Los Angeles'ta kaldı. Bir stüdyo dairede tek başına yaşamasına rağmen, başını hiç belaya sokmadı ve iyi bir çocuktu. L.A.'de yetişkin gözetimi olmadan tek başına yaşamayı "eğlenceli değil" ve "dürüst olmak gerekirse oldukça korkutucu ve yalnız. Ama çalışırken her zaman en mutlu ben olmuşumdur, o yüzden..." Paramount stüdyolarında işe gidip gelebilmek için aynalı kaskı olan bir motosiklet satın aldı.1991'de Galecki, Roseanne Barr tarafından Backfield in Motion (1991) adlı TV filminde oğlunu oynaması için seçildi. Roseanne onu o kadar çok sevdi ki, tek seferlik bir görünüm olarak başlayan, ancak kısa süre sonra David Healy'nin önemli yinelenen rolüne dönüşen sitcom'una gelmesini istedi. Ailesi dizinin dindar izleyicileriydi ve televizyon kahramanlarıyla çalışmak ilk başta biraz gözünü korkutmuştu. Ancak, çok geçmeden, onu övenler kahramanları oldu: Roseanne onun "büyük bir kırılganlık gösterdiğini söyledi." John Goodman ise şunları söyledi: "Eğer bir karnavaldaki o küçük pelüş ayılardan biri olsaydı, üzerinde Wuv me tişörtü olurdu. İnsanlar sadece onunla ilgilenmek istiyorlar." Galecki ayrıca rol arkadaşı Sara Gilbert ve dizinin baş yapımcısı Eric Gilliland ile de çok yakın arkadaş oldu.Roseanne'den (1988) sonra, 1997 yapımı kara komedi Suç Kralları'nda (1997) Christopher Walken'la birlikte komik Ira'dan 2003 yapımı Bookies'de (2003) uyuşturucu bağımlısı bir öğrenciye kadar birçok farklı rolde çalıştı ve Don Roos'un Bir şans daha (2000) ve The Opposite of Sex (1998) filmlerinde eşcinsel karakterleri canlandırdı. The Norm Show'da (1999) Laurie Freeman'ın genç sevgilisi (burada eski Roseanne rol arkadaşı Laurie Metcalf ile bir kez daha çalıştı), My Name Is Earl'de (2005) golfçü, aynı adlı sitcom'da Hope & Faith (2003)'in küçük erkek kardeşi ve My Boys'da (2006) komik parti çocuğu Trouty gibi konuk oyuncu olarak yer aldığı televizyon sektöründen hiç uzak kalmadı. 2006 yılında Douglas Carter Beane'in "The Little Dog Laughed," adlı oyununda çatışmalı ama tatlı erkek eskort Alex rolünü üstlenerek tiyatro köklerine geri döndü ve bu rolüyle 2007 Theatre World Award for Outstanding Browdway Debut ödülünü aldı.2007 yılında The Big Bang Theory (2007) adlı sitcomda Leonard Hofstadter rolüyle küçük ekranlara geri döndü. Roseanne'in eski yapımcılarından Chuck Lorre yeni dizinin yapımcısı olmakla kalmadı, Sara Gilbert ve Laurie Metcalf da konuk oyuncu olarak yer aldı.Galecki kendi kendini kabul etmiş bir motosiklet "nerd," ve bir Harley Davidson Softail Deluxe kullanıyor. Hiç üniversiteye gitmemiş olmasına rağmen şunları söylemiştir: "Ben ölmedim! Öğrenmeyi asla bırakmamalıyız. Özümsemeyi asla bırakmamalıyız " ve böylece yirmili yaşlarının başında çello çalmayı öğrendi. Dünyayı dolaşmayı, resim yapmayı, müziği (aynı zamanda bas gitar çalıyor) ve köpeği Vera ile yürüyüş yapmayı seviyor. Özel hayatı hakkında her zaman çok özel olmuştur ve geçmiş ilişkileri hakkında çok az şey bilinmektedir. Sadece aktrisler Laura Harris ve Kaley Cuoco ile çıktığı doğrulandı. Twitter kullanmıyor ve Galecki bir keresinde şöyle demişti: "Toplumumuzda herhangi bir eylemin bir şekilde yayınlanana kadar değerli olmadığını söyleyen mevcut zihin yapısını anlamıyorum."Halen Los Angeles'ta yaşıyor ancak sık sık kardeşlerinin yaşadığı Chicago'da görülüyor.