Anne Bancroft 17 Eylül 1931'de New York, Bronx'ta, elbise kalıbı üreticisi Michael Italiano (1905-2001) ve telefon operatörü Mildred DiNapoli'nin (1907-2010) ortanca kızı olarak dünyaya geldi. Sinemaya ilk adımını 1952'de Bir gecelik macera (1952) filmiyle attı ve sonraki beş yıl boyunca Goril Firarda (1954), Kaplanların Pençesinde (1954), New York Batakhaneleri (1955), Nightfall (1956) ve Siyah Çoraplı Kadın (1957) gibi pek çok sıradan filmde rol aldı. 1957'de aldığı senaryolardan memnun kalmayarak sinema sektöründen ayrıldı ve sonraki beş yılını Broadway'de oyunlar sahneleyerek geçirdi. Beyazperdeye 1962'de, Oscar kazandığı Karanlığın içinden (1962) filminde canlandırdığı Annie Sullivan karakteriyle döndü. Bancroft daha sonra The Pumpkin Eater (1964), Seni Yaşatacağım (1965), Young Winston (1972), The Prisoner of Second Avenue (1975), Fil Adam (1980), To Be or Not to Be (1983), 84 Charing Cross Road (1987) ve diğer filmlerde beğenilen performanslar sergiledi, ancak en ünlü rolü Aşk Mevsimi'ndeki (1967) Bayan Robinson olacaktı. Gerçek hayatta Katharine Ross'tan sadece sekiz, Dustin Hoffman'dan ise sadece altı yaş büyük olmasına rağmen, filmdeki "yaşlı kadın" statüsü ikoniktir. Bancroft daha sonra filmin diğer çalışmalarını gölgede bırakmasından duyduğu hayal kırıklığını dile getirecekti. Aralıklı kariyerinin büyük bölümünde seçici davranan Bancroft, 90'larda ve 00'ların başında daha sık ekrana çıktı ve Aşk İksiri (1992), Suikastçi (1993), Yılbaşı Tatili (1995), Jane'in Zaferi (1997), Büyük Umutlar (1998), Aramızdaki Sarışın (2000) ve Up at the Villa (2000) gibi filmlerde çeşitli karakterleri canlandırdı. Ayrıca, aralarında Emmy kazandığı Kalbimin Derinliklerinde (1999) filminin de bulunduğu bazı TV filmleri çekmeye başladı. Bancroft ne yazık ki 6 Haziran 2005'te 73 yaşında rahim kanserinden vefat etti. Hastalığını kamuoyuna açıklamadığı için ölümü pek çok kişiyi şaşırttı. Hayatta kalanlar arasında 41 yıllık eşi Mel Brooks ve 1972'de doğan oğulları Max Brooks da vardı. Son filmi olan animasyon filmi Delgo (2008) ölümünden sonra 2008 yılında gösterime girdi ve onun anısına ithaf edildi.