T.R. Knight, Minneapolis Guthrie Tiyatrosu'nun oyuncu topluluğunun bir üyesiydi. Buradaki rolleri arasında Eugene O'Neill'in "Ah, Wilderness!" oyunundaki Richard Miller ve Peter Shaffer'ın "Amadeus" oyunundaki Amadeus vardı.New York sahnesinde "Noises Off" oyununda Tim Allgood, "Tartuffe" oyununda Damis, "This Lime Tree Bower" oyununda Joe ve "Anto Scattergood" oyununda Brendan Hilliard karakterlerini canlandırdı.Scattergood" oyunundaki performansıyla Drama Desk'te En İyi Erkek Oyuncu dalında aday gösterildi. İlk rolünü beş yaşındayken Guthrie Tiyatrosu'nun her yıl düzenlediği A Christmas Carol oyununda Tiny Tim'i canlandırarak aldı.